Kîta ELISA li ser bingeha qonaxa hişk a antîjen an antîpodê û nîşankirina enzîmê ya antîjen an antîpodê ye. Antîjen an antîpotê ku bi rûxara hilgirê zexm ve girêdaye hîn jî çalakiya xwe ya immunolojîk diparêze, û enzîma ku bi antîjen an antîpîdê hatî nîşankirin hem çalakiya xwe ya immunolojîk hem jî çalakiya enzîmê diparêze. Di dema destnîşankirinê de, nimûneya di bin ceribandinê de (ku tê de antîpoş an antîjen tê pîvandin) bi antîjen an antîpodê ya li ser rûyê hilgirê hişk re reaksiyonê dike. Kompleksa antîjen-antîbody ku li ser hilgirê hişk pêk tê bi şuştinê ji madeyên din ên di şilê de tê veqetandin.
Antîjen an antîbodên bi etîketa enzîmê têne zêdekirin, ku ew jî bi reaksiyonê bi hilgirê hişk ve girê didin. Di vê demê de, mîqdara enzîmê di qonaxa hişk de bi rêjeya maddeya di nimûneyê de ye. Piştî lê zêdekirina substratê reaksiyona enzîmê, substrat ji hêla enzîmê ve tê katalîz kirin û dibe hilberên rengîn. Mîqdara hilberê rasterast bi mîqdara maddeya ceribandinê ya di nimûneyê re têkildar e, ji ber vê yekê analîzek kalîteyî an hejmarî dikare li gorî kûrahiya reng were kirin.
Berbiçavbûna katalîtîk a bilind a enzîman nerasterast encamên bersiva berevaniyê zêde dike, û vekolînê pir hesas dike. ELISA dikare ji bo destnîşankirina antîjenan were bikar anîn, lê di heman demê de dikare ji bo destnîşankirina antîkoran jî were bikar anîn.
Prensîbên bingehîn ên kîtê ELISA
Ew reaksiyonek taybetî ya antîjen û antîpodê bikar tîne da ku tişt bi enzîmê ve girêbide, û dûv re reaksiyona rengîn di navbera enzîm û substratê de ji bo destnîşankirina hejmarî çêdike. Armanca pîvandinê dikare antibody an antigen be.
Di vê rêbaza destnîşankirinê de sê reagent hene:
â Antîjen an antîpota qonaxa zexm (adsorbent)
â¡ Antîjen an antîpodê (nîşanker) nîşankirî bi enzîmê
⢠substrate ji bo çalakiya enzîmê (karkerê pêşkeftina rengîn)
Di pîvandinê de, antîjen (antîbody) pêşî bi hilgirê zexm ve tê girêdan, lê dîsa jî çalakiya xweya xweparastinê diparêze, û dûv re hevbendek (marker) antîjen (antîjen) û enzîmê tê zêdekirin, ku hîn jî çalakiya xweya parastinê û enzîma xweya bingehîn diparêze. çalakî. Dema ku konjugate bi antîjenê (antîbody) ya li ser hilgirê hişk re reaksiyonê dike, substrata têkildar a enzîmê tê zêdekirin. Ango hîdrolîza katalîtîk an reaksiyona REDOX û reng.
Rengê rengê ku ew hildiberîne bi mîqdara antîjen (antîbody) ya ku tê pîvandin re têkildar e. Ev hilbera rengîn dikare bi çavê rût, mîkroskopa optîkî, mîkroskopa elektronîkî ve were temaşe kirin, dikare bi spectrophotometer (amûra labelê ya enzîmê) jî were pîvandin. Rêbaz hêsan, hêsan, bilez û taybetî ye.