danasîna bingehîn
Erîtrosît lîzatê yek ji wan rêbazên herî hêsan û hêsan e ji bo rakirina şaneyên sor ên xwînê, ango perçekirina şaneyên sor ên xwînê bi lîzatê, ku zirarê nade şaneyên nuklekirî û dikare bi tevahî hucreyên xwînê yên sor jê bike. Parçekirina lîzatê rêbazek sivik rakirina hucreyên sor ên xwînê ye, ku bi giranî ji bo veqetandin û paqijkirina hucreyên tevnvîsê yên ku ji hêla digestiya enzîmê ve têne belav kirin, veqetandin û paqijkirina lîmfosîtan, û rakirina şaneyên sor ên xwînê di ceribandinên proteîna tevnvîs û navokî de tê bikar anîn. derxistina asîdê. Hucreyên tevnvîsê yên ku bi lîzata hucreyên xwînê yên sor ve têne wergirtin hucreyên xwînê yên sor nagirin, û ew dikarin bêtir ji bo çanda seretayî, tevhevkirina hucreyê, cytometrya herikînê, veqetandin û derxistina asîda nukleîk û proteînê, hwd.
Talîmatên ji bo bikaranîna
Nimûneya şaneya tevnê
1. Tiştên teze ji hêla pankreas/enzîm an jî kolajenazê ve hatin vejandin û di nav suspensiona yek şaneyê de hatin belav kirin, û supernatant bi santrîfûjasyonê hate avêtin.
2. ELS lîzatê ji sarincê di 4 de hilînin, lîzata ELS bi rêjeya 1:3-5 li bermaya şaneyê zêde bikin (3-5 ml lîzatê li 1 ml hucreya kompaktkirî zêde bikin), bi nermî bifînin û tevlihev bikin.
3. Di 800-1000 rpm de 5-8 hûrdeman santrîfuj bikin û şilava zelal a sor ya jorîn bavêjin.
4. Parçeya barkirî hat berhevkirin û 2-3 caran bi çareseriya Hank an jî çareseriya çanda bêserûm hate santrîfujkirin.
5, heke şikestin ne temam/temam be dikare gavên 2 û 3 dubare bike.
6. Hucreyên Resuspension ji bo ceribandinên paşîn; Ger RNA were derxistin, çêtir e ku meriv wiya di çareseriya ku ji Gav 4 ve hatî amadekirin de bi karanîna ava DEPC were kirin
Hucreyên xwînê yên sor xwedan çerxa jiyanê ya pir kurt in, tenê 120 roj in, lê ew xwînê pir zû çêdikin, û di vê rewşê de ew bi taybetî dikarin di dabeşkirina şaneyê de ne, û ew şaneyên herî bilez ên dabeşker in, ji ber vê yekê ev şaneyek pir bi nirx e. ji ber vê yekê ji bo çanda şaneyê pir bikêr e. Ew pir hêsan e, organel tê de tune, tenê parzûnên xaneyê û proteîn hene.